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miR-21在蛛网膜下腔出血后通过调节TLR4/NF-κB通路影响神经炎症的作用
朱叶山, 余德, 马晨诚, 程哲, 刘大川, 王大巍
目的 通过体内外实验探讨miR-21对蛛网膜下腔出血(SAH)后神经炎症的作用及其潜在机制。
方法 体外实验中,转染试剂介导miR-21 mimics转染到N9小胶质细胞上调miR-21的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-21可以靶向调控TLR4基因;通过RT-qPCR、Western Blot和ELISA实验检测miR-21过表达对TLR4/NF-κB炎症通路的影响。体内实验中,采用颈内动脉穿刺法建立大鼠SAH模型,侧脑室注射miR-21 mimics;术后24 h采用改良Garcia评分评估神经功能,Sugawara评分评估出血严重程度;免疫组化和Western Blot检测脑皮质中TLR4的表达。
结果 体外实验结果显示,转染试剂介导miR-21 mimics转染到N9小胶质细胞可以上调miR-21的表达;miR-21可以靶向调控TLR4基因;过表达miR-21可以抑制TLR4、NF-κB及其相关炎症因子的表达。体内实验显示,过表达miR-21可以改善SAH大鼠的神经功能评分,减轻SAH出血严重程度,可以抑制SAH脑皮质中TLR4的阳性细胞数和蛋白表达水平。
结论 miR-21可通过靶向抑制TLR4/NF-κB信号通路减少炎症因子释放,减轻SAH后神经炎症,发挥神经保护作用。
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